全球每年由沙門氏菌引起的胃腸炎病例約有九千多萬(wàn)例，導(dǎo)致約20萬(wàn)人死亡，其中85%病例是食源性的，常居食物中毒榜首。因此，腸桿菌科的沙門氏菌是一類重要的、全球性的人畜共患的食源性致病菌，其檢測(cè)在畜禽健康、人類公共安全及食品安全等方面意義重大。
隨著技術(shù)的進(jìn)步，沙門氏菌鑒定雖然有多種新鑒定手段，如免疫學(xué)、分子生物學(xué)、基于細(xì)胞物理/化學(xué)特征的檢測(cè)技術(shù)、生物傳感器等檢測(cè)技術(shù)，但目前限制最少、應(yīng)用最廣泛的還是傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)，以形態(tài)學(xué)觀察、培養(yǎng)特征、生理生化特征、抗原特征的鑒別為主。
傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)條件簡(jiǎn)單、技術(shù)成熟、假陽(yáng)性率低，但存在檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，準(zhǔn)確度受操作人經(jīng)驗(yàn)判斷和菌活性影響等缺點(diǎn)，而沙門氏菌屬包含2個(gè)種，含6個(gè)亞種，2579個(gè)血清型，具有多種生化組合特征，其生理生化特征鑒定受人員經(jīng)驗(yàn)判斷和菌活性影響最大，這也是沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定的一大難點(diǎn)。
下面我們就沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定流程、商品化試劑盒的使用，沙門菌及常見(jiàn)干擾菌生化鑒定現(xiàn)象，常見(jiàn)問(wèn)題來(lái)為您解析這一操作步驟。
01?? 沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定 流程
為幫助大家理順流程，我們依據(jù)GB4789.4-2016標(biāo)準(zhǔn)，將沙門氏菌屬的生化鑒定判定步驟簡(jiǎn)化如下圖：
流程??
其中，必須用到的生化試劑有五種：
三糖鐵瓊脂、賴氨酸脫羧酶、靛基質(zhì)、尿素、氰化鉀。
可能用到的生化試劑有三種：
甘露醇、山梨醇、ONPG
?測(cè)試中分離的可疑單菌落經(jīng)純化后，每個(gè)菌株測(cè)試一組，以確認(rèn)該菌是否為沙門氏菌屬。
02? 沙門氏菌傳統(tǒng)生化鑒定商品化試劑盒 操作
為更方便、快速地完成沙門氏菌屬的系列生化鑒定并判定，我們可以選購(gòu)商品化套裝生化試劑盒。
下面，我們以陸橋DBI-05沙門氏菌干制生化鑒定試劑盒操作視頻為大家演示：
https://v.qq.com/x/page/m3202nftgzu.html
視頻指路牌：
經(jīng)過(guò)培養(yǎng)、滴加附加試劑后，按下表判斷各項(xiàng)生化試劑結(jié)果：
然后，參照01沙門氏菌屬傳統(tǒng)生化鑒定流程部分，判斷該菌是否為沙門氏菌。
03? 沙門氏菌及常見(jiàn)干擾菌生化鑒定 結(jié)果
典型（完全符合A1組合結(jié)果）的沙門氏菌生化結(jié)果為：
其他常見(jiàn)沙門及干擾菌生化結(jié)果見(jiàn)下表：
04? 沙門氏菌傳統(tǒng)生化鑒定 常見(jiàn)問(wèn)題
在沙門氏菌傳統(tǒng)生化鑒定過(guò)程中，我們還可能會(huì)遇到以下常見(jiàn)問(wèn)題：
Q1：在三糖鐵實(shí)驗(yàn)中，菌株產(chǎn)硫化氫變黑覆蓋了斜面底層的顏色，該如何判定底層產(chǎn)酸還是產(chǎn)堿？
A1：測(cè)試菌株產(chǎn)硫化氫，可判定底層產(chǎn)酸變黃。
為更好地觀察判定，可①減少接種量（先斜面劃線，再留少量菌進(jìn)行穿刺，注意不要穿刺到底部）；②縮短培養(yǎng)時(shí)間（8h-18h）。
此外，還需要注意封膜保濕，防止斜面干縮導(dǎo)致結(jié)果誤判。
Q2：生化鑒定使用的菌懸液濁度要求多少？
A2：生化鑒定套裝為微量鑒定系統(tǒng)，對(duì)于菌懸液濃度有要求，使用0.5麥?zhǔn)蠞岫冗M(jìn)行接種，菌懸液濃度過(guò)大或者過(guò)小對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度有影響。
Q3：尿素酶變淺橙色，如何判定是陰性還是陽(yáng)性？
A3：尿素酶黃色或橙色均判定為陰性，只有玫紅色或紅色才判定為陽(yáng)性。
還有更多干制生化套裝，歡迎您的關(guān)注和來(lái)電咨詢。
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