目前已頒布的維生素測定系列標(biāo)準(zhǔn)中都增加了微孔板法，此方法在制作標(biāo)準(zhǔn)系列管、試樣系列管，以及測定吸光度值時(shí)，簡化了試驗(yàn)操作，相比之前傳統(tǒng)的“試管法”，節(jié)省了大量的準(zhǔn)備工作。相信不少檢驗(yàn)員心里都暗暗竊喜，認(rèn)為從此就可以從“試管中”解放出來了，但事實(shí)真的如大家所想嗎？

也許未必！體系的縮小帶來的是更多精準(zhǔn)的要求，任何微小因素的影響都有可能導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。為此，北京陸橋特別推出國標(biāo)維生素微孔板法即用型產(chǎn)品，為您避開影響因素，保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。下面就聽小編仔細(xì)盤點(diǎn)影響該實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)重要因素：

一、標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度配制不準(zhǔn)確，導(dǎo)致失敗

01 天平精度不達(dá)要求，導(dǎo)致稱量不準(zhǔn)確

標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)采用高精度天平稱量。在葉酸、生物素和泛酸標(biāo)準(zhǔn)中，均規(guī)定使用精確至0.1mg（即0.0001g）的天平進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的稱量；而維生素B12則更需使用精確至0.01mg（即0.00001g）的天平進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的稱量，以此才能達(dá)到精確稱量的目的。

02 溶解和轉(zhuǎn)移操作中標(biāo)準(zhǔn)品的損失

很多實(shí)驗(yàn)員在用容器溶解標(biāo)準(zhǔn)品并轉(zhuǎn)移到容量瓶的過程中，有溶解不充分、溢灑及轉(zhuǎn)移不完全的情況，這會導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品損失，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度降低。?

03容量瓶定容不準(zhǔn)確

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程中需多次定容，每次定容都需謹(jǐn)慎對待，一旦哪個(gè)步驟定容不準(zhǔn)確，就會引發(fā)連鎖問題。定容后混勻不充分，容量瓶上下顛倒時(shí)發(fā)生漏液情況，或者從高濃度配置低濃度時(shí)，吸取量不準(zhǔn)確，都會導(dǎo)致配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度不準(zhǔn)確，進(jìn)而導(dǎo)致測定結(jié)果偏高或偏低。

微孔板法即用型試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)溶液配制VS傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

國標(biāo)微孔板法即用型試劑盒中，提供了定量凍干標(biāo)準(zhǔn)品。其標(biāo)準(zhǔn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的配置，只需使用試劑盒中的無菌水充分溶解標(biāo)準(zhǔn)品凍干試劑即可，十分簡便。因規(guī)避了上述國標(biāo)方法中標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程中的諸多不準(zhǔn)確因素，保證了標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的準(zhǔn)確性。并且標(biāo)準(zhǔn)系列管每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)濃度均與國標(biāo)要求的濃度一致，標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)提供來源說明，可以溯源，保證大家放心使用。

二、?菌株活性不穩(wěn)定，導(dǎo)致失敗

01菌株活化及保存不易

四項(xiàng)維生素試驗(yàn)所需標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC7469、ATCC7830、ATCC8014）均需嚴(yán)格按照菌株說明書進(jìn)行復(fù)蘇活化。菌株活化之后，若想長期保存，最好采用超低溫冷凍保存法（需要有超低溫冰箱）進(jìn)行保存，才能保證其活力。

02菌株使用不易

標(biāo)準(zhǔn)菌株活化及復(fù)蘇后，不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，至少需使用相應(yīng)培養(yǎng)基連續(xù)傳種2-3代以上，才可以進(jìn)行維生素檢測試驗(yàn)。否則易出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)系列管和試樣管不生長或生長不好的情況。

03菌株活力判斷不易

標(biāo)準(zhǔn)菌株在乳酸桿菌平板或乳酸桿菌肉湯中生長良好，肉眼看平板上菌落較大或肉湯中菌液渾濁，但并不等于該菌活力（對特定維生素利用敏感）良好。例如，經(jīng)常有標(biāo)準(zhǔn)系列管吸光度值（即OD值）雖成梯度但整體數(shù)值較低的情況。而造成這種情況的原因就是該菌對特定維生素利用不夠敏感，需重新從儲備菌株復(fù)蘇并傳代，再次進(jìn)行維生素測定試驗(yàn)以驗(yàn)證菌株的活力。

微孔板法即用型試劑盒中凍干菌球VS國標(biāo)自制接種液

國標(biāo)微孔板法即用型試劑盒中，提供了凍干定量菌球。該菌球真空包裝，菌濃度定量制備，且可以保證菌株的活力，直接加入培養(yǎng)基中即可使用。相比國標(biāo)自制接種液，則需要活菌、保菌、提前制備種子液，洗菌、調(diào)菌濃度等繁瑣操作，在方便簡單的同時(shí)，極大的提高了試驗(yàn)的成功率！同時(shí)，我司還提供了標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源說明，可存檔溯源。

三、?培養(yǎng)基影響，導(dǎo)致失敗

維生素測定培養(yǎng)基制備時(shí)也有很多注意事項(xiàng)：

第一、要求從稱量勺到配制培養(yǎng)基用的三角瓶，都需經(jīng)過鹽酸浸泡并至少200℃高溫處理2h，去除維生素殘留干擾，才可以使用，并且最好每個(gè)項(xiàng)目專用一套器材。堅(jiān)決不可與實(shí)驗(yàn)室日常檢測用器皿混用，避免混入待測維生素。

第二、培養(yǎng)基配制用水至少需達(dá)到二級水標(biāo)準(zhǔn)，才可以使用。

第三、高壓滅菌121℃，5min，滅菌后及時(shí)取出冷卻，避免褐變。

微孔板法即用型試劑盒中即用培養(yǎng)基VS滅菌培養(yǎng)基

國標(biāo)微孔板法即用型試劑盒中，提供了即用型無菌液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)和凍干添加劑。將培養(yǎng)基中敏感不穩(wěn)定成分進(jìn)行凍干保存，可以進(jìn)一步確保培養(yǎng)基的性能，使用前將添加劑溶解后與基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻，就可直接使用。一步操作，簡單方便。

四、?耗材干擾，導(dǎo)致失敗

在過去幾年的維生素實(shí)驗(yàn)中，我們經(jīng)常遇到菌生長不好、測定結(jié)果低、回收率低等情況，分析各種原因時(shí)猛然發(fā)現(xiàn)：原來一次性耗材也是影響成敗的一環(huán)。因?yàn)槭惺酆芏嗪牟暮杏绊憸y定菌株生長的物質(zhì)，從而導(dǎo)致各種問題出現(xiàn)。此外，維生素微孔板法試驗(yàn)所使用的微孔板必須滿足以下五點(diǎn)才能保證好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

1）無菌

2）無維生素污染

3）有無菌封口膜且膜能封住每一個(gè)孔，避免孔間不同梯度污染

4）孔深度要夠（因?yàn)榉磻?yīng)體系需300uL）

5）透度要高（透度影響酶標(biāo)儀讀數(shù)）

市面上滿足無菌條件的96孔微孔板比較常見，但同時(shí)滿足上述五點(diǎn)要求的不多，需要大家仔細(xì)甄別。推薦大家購買我公司精心挑選的微孔板，此微孔板不僅滿足上述5點(diǎn)要求，并且經(jīng)我們試驗(yàn)驗(yàn)證微孔板材質(zhì)不含抑菌成分，維生素測定結(jié)果比較穩(wěn)定。

陸橋牌維生素微孔板法試劑盒系列產(chǎn)品

以上是小編精心整理的關(guān)于維生素檢測實(shí)驗(yàn)中的主要影響因素，也是相對比較難控制和把握的。北京陸橋提供的維生素微孔板法即用型試劑盒系列產(chǎn)品，在幫您避開容易導(dǎo)致試驗(yàn)失敗因素的同時(shí)保障您快速獲得合格的檢測結(jié)果，讓維生素檢測變的簡單！